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高效液相色譜系統(tǒng)準(zhǔn)備緩沖液的技巧
液相色譜是世界各地實(shí)驗(yàn)室使用的流行純化技術(shù),如果系統(tǒng)設(shè)置和操作正確,它可以立即從混合物中分離出所需的化合物。
學(xué)習(xí)如何使用和制備緩沖液和溶劑是能提高系統(tǒng)性能的重要技巧之一,準(zhǔn)確制備和正確選擇緩沖液對(duì)于在液相色譜中獲得可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。
例如,了解極性和溶解度(極性或非極性)、電離、您正在尋找的紫外吸光度將有助于指導(dǎo)您使用特定的色譜柱和溶劑組。試劑和溶劑,包括您使用的水,都應(yīng)該是高質(zhì)量的 HPLC 級(jí),以減少緩沖液中不需要的微粒。即使是使用高純度實(shí)驗(yàn)級(jí)別的溶劑,也需要在進(jìn)入色譜系統(tǒng)前進(jìn)行過(guò)濾。細(xì)菌幾乎可以在任何溶液中適應(yīng)和生長(zhǎng),甚至是有機(jī)溶劑,具體取決于濃度,為防止細(xì)菌生長(zhǎng)堵塞色譜柱篩板,每次制備新的緩沖液批次時(shí)更換緩沖液容器,檢查緩沖液瓶/袋是否有細(xì)菌生長(zhǎng)跡象。搖晃或攪拌時(shí)出現(xiàn)渾濁的溶液應(yīng)丟棄。使用抑菌劑(例如 0.02% 疊氮化鈉)處理會(huì)延長(zhǎng)溶液的儲(chǔ)存時(shí)間,盡管這些試劑可能會(huì)影響您的色譜圖。